- 吴婷婷;张璐;韩馨馨;丁颖;魏铭清;徐艺玫;张辉;邓兴梅;
旨在研究布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞和人胚胎滋养层细胞后,人鼠同源的长链非编码RNA(lncRNA)转录水平表达差异性。参考相关文献筛选出21对人鼠同源lncRNA待检靶基因,以感染复数(MOI)=100的流产型布鲁氏菌S2308侵染小鼠巨噬细胞(RAW264.7)和人胚胎滋养层细胞(HTR-8),实时荧光定量PCR检测不同时间点21对人鼠同源lncRNA表达量;利用在线网站对人鼠同源lncRNA进行生物信息学分析,构建竞争性内源RNA(ceRNA)网络图,进行生物富集分析。结果:布鲁氏菌侵染RAW264.7细胞时,与对照组相比,21对lncRNA在不同时间段转录水平存在差异,如lncRNA Gm28592在侵染后4、8、12 h转录水平显著上调(P<0.05);布鲁氏菌侵染HTR-8细胞时,与对照组相比,18条lncRNA在侵染后8 h转录水平均存在显著差异(P<0.001),在其他时间段有6条lncRNA转录水平呈显著差异性(P<0.001); lncRNA Gm29331、Gm28592在上述2种细胞中侵染后4、8、12 h的转录水平增加趋势相同,但上调幅度具有差异,lncRNA Gm37803-201转录水平下降趋势相同且在侵染后4 h转录水平增加幅度具有差异。综上,布鲁氏菌侵染RAW264.7和HTR-8细胞,在同一时间,不同人鼠同源lncRNA转录水平呈差异性表达;同一人鼠同源lncRNA在不同侵染时间,其转录水平亦呈差异性,本研究筛选出3条表达趋势一致且转录水平差异表达的lncRNA并对其进行生物信息学分析,为进一步探究布鲁氏菌致病机制提供了新的思路。
2026年04期 v.58;No.489 51-63页 [查看摘要][在线阅读][下载 725K] [下载次数:5 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 郭仲洲;菅瑞珍;卢泽宇;李建;杨瑾;徐芳;沈丹琪;杨燕燕;王峰;刘淑英;何秀玲;张传强;
旨在通过分析近15年国内外有关奶牛繁殖障碍领域的发文情况,预测奶牛繁殖障碍相关领域的研究趋势,为未来的奶牛繁殖障碍研究提供参考。从中国知网(CNKI)中国学术期刊全文数据库和科学引文索引数据库(Web of Science)收集2010年1月1日至2025年2月28日的相关数据,使用数据库自带工具及CiteSpace和VOSviewer进行数据分析,生成发文趋势、高频引文献分析、作者分析、机构分析、关键词分析和国家分析的可视化图表。结果:共筛选出204篇中文文献与320篇英文文献;主要工作聚焦于研究能量代谢等生理方面引起的奶牛繁殖障碍,未来的研究趋势将集中于识别奶牛繁殖障碍的各种疾病或环境影响因素,针对其收集大量基础生理数据并建立准确的判断指标,同时利用人工智能技术建立诊断模型以进行监控或诊断。
2026年04期 v.58;No.489 64-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 601K] [下载次数:18 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 常新见;张雨杰;赵永强;米春柳;董卫华;王天云;宋文娟;
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)对全球养猪业危害严重,现有疫苗存在免疫效果或安全性不足的缺陷。为提高核酸疫苗的免疫原性,本研究基于PRRSV结构蛋白(GP3、GP4、GP5)和非结构蛋白(NSP2、NSP7、NSP12)的8个B细胞表位,通过柔性连接肽串联,并在N端引入树突状细胞肽(DCpep)、通用T细胞表位PADRE及肠微褶皱细胞肽(Mpep),构建多表位抗原NGP。进一步将铁蛋白(Ft)与NGP融合,构建真核表达质粒pc DNA3.1-NGP-Ft,以评估Ft对DNA疫苗的免疫增强作用。试验前期通过原核表达系统制备重组蛋白MBP-NGP,并免疫小鼠验证其免疫原性。Western blot和间接免疫荧光(IFA)证实NGP及NGP-Ft在细胞中成功表达。小鼠免疫结果显示,pc DNA3.1-NGP-Ft组相较于pcDNA3.1-NGP组,ELISA抗体效价、中和抗体水平、脾淋巴细胞增殖能力及γ干扰素(IFN-γ)分泌量均增强(P<0.05)。淋巴结生发中心分析表明,Ft融合抗原可延长淋巴结内抗原滞留,促进免疫应答。本研究首次证实Ft可有效提升PRRSV多表位DNA疫苗的体液与细胞免疫水平,为新型纳米颗粒疫苗的研发提供了理论依据。
2026年04期 v.58;No.489 75-82页 [查看摘要][在线阅读][下载 467K] [下载次数:13 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 付修龙;金映红;宫震;薛晶;汪萍;王延;丁煜恭;刘姝悦;柳梦婕;平继辉;李月;夏俊;
多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)和溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,MH)是导致羔羊肺炎、腹泻及败血症的主要病原,本研究将制备Pm和MH二联四价灭活疫苗,并通过小鼠和绵羊临床试验评价其免疫保护效果。以氢氧化铝作为佐剂制备PmA、PmD、MHA1和MHA2型二联四价灭活疫苗,对21日龄小鼠进行初次免疫,此后每隔14 d加强免疫,共免疫3次,三免后第7天进行攻毒保护试验;初次免疫后第21、28、35天进行采血,使用间接ELISA进行血清抗体检测;在怀孕绵羊中开展临床应用试验:试验一为产前40 d免疫一次,产羔后2~3 d对羔羊免疫一次,试验二为羔羊出生后3 d免疫一次,7 d后加强免疫。结果:该疫苗对小鼠的保护率能达到80%~100%,其中对MHA1、MHA2、PmD型攻毒小鼠的保护率为100%,对PmA型的保护率为80%;抗体水平检测显示21~28 d产生的抗体水平显著提升,3次免疫的抗体水平显著高于2次免疫;利用该二联四价疫苗对出生3日龄内羔羊进行免疫,1周后加强免疫可以有效提高羔羊成活率。综上,该二联四价灭活疫苗具有良好的免疫保护效果,具备作为候选疫苗的潜质。
2026年04期 v.58;No.489 83-89页 [查看摘要][在线阅读][下载 230K] [下载次数:5 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 刘淑华;陈鑫;候梦哲;张振;马佰贺;郭美亮;李莲瑞;
旨在探究分离自新疆阿克苏地区柯坪县骆驼场发热骆驼血液样本的菌株生物学特性。采用细菌分离鉴定、生化试验、16SrRNA基因测序、生长曲线测定、耐药基因检测、药敏试验及小鼠致病性试验等方法,对分离自发热骆驼血液的病原菌进行系统性研究。结果:从3份血样中分离到1株细菌,为革兰阳性球菌,葡萄串状排列;生化鉴定结果表明,分离菌株对蔗糖、甘露糖、麦芽糖、蕈糖、甘露醇、N-乙酰葡萄糖胺、硝酸盐还原及果糖试验呈阳性;结合16SrRNA基因序列比对确定分离菌株为松鼠哺乳动物球菌(Mammaliicoccus sciuri);生长曲线显示,分离菌株在培养6h后进入对数生长期;耐药基因mecA、blaCMY-2、ermB、ermC、tetM、aacA-aphD、aadA1、sul1检测为阳性;药敏试验显示,分离菌株对多肽类及利福霉素类高度敏感,而对大环内酯类、林可酰胺和喹诺酮类等6类抗菌药物耐药;小鼠攻毒试验显示,腹腔注射0.2mL浓度为2.2×10~9CFU/mL的分离菌,可致小鼠100%死亡。本研究为骆驼养殖场病原监测与临床精准用药提供了理论依据。
2026年04期 v.58;No.489 90-97页 [查看摘要][在线阅读][下载 597K] [下载次数:6 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 翟瑞钰;杨伏春;屈海龙;陈欢;苗雨润;常星;冯曼玉;李金明;郑龙三;王志亮;钱莺娟;
脱氧鸟苷三磷酸焦磷酸酶(dUTPase)作为核苷酸代谢的关键调控因子,在自然界中广泛分布,多种病毒基因组编码的dUTPase被报道具有独特的生物学功能。本研究旨在探究牛结节性皮肤病病毒(LSDV)编码的dUTPase具体功能。基于LSDV/XJ/201901毒株基因序列,采用mRNA疫苗技术构建脂质纳米颗粒(LNP)包装的LSDV dUTPase mRNA(LNP-dUTPase mRNA),将其作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗LSDV dUTPase的多克隆抗体。经免疫印迹试验与间接免疫荧光试验验证,所获抗体可特异性识别细胞外源表达蛋白。本研究创新性地通过mRNA免疫技术制备出抗dUTPase蛋白多克隆抗体,为解析LSDV dUTPase的生物学功能提供了关键试验材料。
2026年04期 v.58;No.489 98-103页 [查看摘要][在线阅读][下载 337K] [下载次数:3 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 蔺欣欣;韦宁;杨兴淼;谢盛达;曹瑞兵;
旨在制备靶向日本脑炎病毒(JEV)包膜蛋白结构域Ⅲ(EDⅢ)的特异性单克隆抗体(m Ab)并鉴定其抗原表位。通过原核表达成功制备EDⅢ重组蛋白,经纯化后免疫BALB/c雌鼠。运用杂交瘤细胞技术成功制备出4株可稳定分泌抗EDⅢ蛋白抗体的杂交瘤细胞3B8、4H1、6C5和6E9,其腹水效价依次为1∶409 600、1∶1 638 400、1∶204 800和1∶1 638 400。亚型鉴定结果表明:4株m Abs重链均属于Ig G2b亚类,轻链为Kappa型。特异性鉴定结果显示:4株m Abs均能识别JEV EDⅢ蛋白及病毒感染的细胞,与鸭坦布苏病毒(DTMUV)无交叉反应,但均未表现出中和活性。表位鉴定结果显示:m Ab 3B8和6C5抗原识别区域位于~(62)RLVTVNPFVATSS~(74),m Ab 4H1和6E9抗原识别区域位于~(75)SNSKVLVEMEPP~(86)。结合生物信息学分析证实,抗原表位在JEV不同基因型间高度保守且位于蛋白表面。本研究成功获得4株针对JEV EDⅢ蛋白的单克隆抗体并鉴定了其识别的线性表位,为快速检测JEV感染和探究E蛋白的结构与功能奠定基础。
2026年04期 v.58;No.489 104-114页 [查看摘要][在线阅读][下载 600K] [下载次数:6 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 孙海凤;孙杨杨;白娟;姜平;
为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体检测方法准确性,本研究采用分子筛方法和超速离心法制备PRRSV全病毒纯化抗原和Marc-145细胞模拟抗原,SDS-PAGE与Western blot结果显示,PRRSV全病毒纯化抗原主要包含M蛋白和N蛋白,细胞模拟抗原不与PRRSV抗体发生反应。通过反应条件优化,建立了PRRSV间接ELISA抗体检测方法,阴阳性抗体判定标准S/P临界值为0.4,敏感性96.47%,特异性96.36%。该方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和伪狂犬病病毒(PRV)等均无交叉反应性。批内和批间变异系数均低于10%。采用788份猪临床血清样品进行比对检测,该方法与间接免疫荧光试验(IFA)相比,Kappa值为0.91,而与IDEXX商品化试剂盒相比,Kappa值为0.72。上述结果表明,该方法敏感性高,特异性强,重复性好,是一种潜在的可用于PRRSV抗体检测、流行病学调查和疫病净化的方法。
2026年04期 v.58;No.489 115-121页 [查看摘要][在线阅读][下载 211K] [下载次数:22 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ]